Generale

Principi generali e applicazioni della biochimica clinica e della biologia molecolare clinica.
Descrizione e utilizzo dei principali test di laboratorio di biochimica clinica e loro uso nei corrispondenti percorsi diagnostico-terapeutici.
Descrizione e utilizzo dei principali test di laboratorio di biologia molecolare clinica ed esempi di utilizzo nella diagnosi delle più frequenti malattie genetiche.

Argomenti specifici

Principali metodi analitici di biologia molecolare: amplificazione enzimatica in vitro (PCR), ibridazione diretta, ibridazione inversa, sequenziamento del DNA, MLPA, principi di next generation sequencing.

Ferro, protoporfirina e globine: fisiopatologia, biochimica clinica e principali metodi di studio in laboratorio. Anemie, classificazione e diagnostica di laboratorio. Anemia sideropenica, porfirie, talassemie e emoglobinopatie.

Esame emocromocitometrico automatizzato: principi operativi, esempi di apparecchiature, principali parametri relativi a eritrociti, leucociti e piastrine. Esempi di alterazioni dell’esame emocromocitometrico. Relazione tra le anemie e i parametri dell’esame emocromocitometrico.

Cataboliti dell’eme. Bilirubina, bilinogeni e itteri: metabolismo e diagnostica di laboratorio.

Principi di genomica, trascrittomica e proteomica. Diagnostica di laboratorio dei marcatori tumorali genotipici. Significato e limiti interpretativi.

Ciaccio, Lippi. Biochimica Clinica e Medicina di Laboratorio. Edizioni Edises.

Medicina di Laboratorio I semestre:

Variabilità in medicina di laboratorio e controlli di qualità. Come analizzare un campione. Principali metodi analitici. Curva e materiali di calibrazione. Appropriatezza in Medicina di Laboratorio. Corretto iter diagnostic. Saper richiedere una indagine di laboratorio: Perché richiedere un esame di laboratorio; La richiesta cartacea; Il LIS (Sistema Informatico di Laboratorio). La variabilità in Medicina di Laboratorio: La variabilità analitica; La variabilità biologica; Prelievo e raccolta del campione; Il prelievo di sangue venoso periferico; Scelta ed utilizzo delle provette; Criteri di accettabilità del campione. Criteri di attendibilità di un’indagine di laboratorio: Precisione, accuratezza, sensibilità e specificità analitica. L’errore in Medicina di Laboratorio. I controlli di qualità intra ed inter laboratorio. Saper interpretare una indagine di laboratorio: Variabilità cronobiologica; Indice di individualità; Intervalli di riferimento, valori critici e limiti decisionali; Confronto longitudinale e trasversale e differenza critica. Come valutare un test diagnostic: Prevalenza, sensibilità e specificità diagnostic; Efficacia diagnostica e valori predittivi positivi e negative; Curve ROC.

Medicina di Laboratorio II semestre:

Separazione elettroforetica delle sieroproteine: aspetti teorici e risvolti clinici. Plasmaproteine, criteri generali. Proteine della fase acuta. Come si studiano le proteine plasmatiche: proteine totali del siero; separazione delle proteine sieriche. Elettroforesi (mobilità elettroforetica, punto isoelettrico, elettroendosmosi): elettroforesi su fase solida; elettroforesi capillare. Il referto dell’elettroforesi. Il tracciato elettroforetico (descrizione delle principali proteine separate elettroforeticamente ed indicazioni cliniche alla loro richiesta): prealbumina, albumina (analbuminemia e bis-albuminemia), alfa1-antitripsina (deficit di alfa1-antitripsina) e altre alfa1 globuline, alfa2-macroglobulina e aptoglobina, transferrina e transferrina carboidrato carente, frazione C3 del complemento, gamma globuline. Condizioni associate ad alterazioni specifiche del tracciato elettroforetico: epatopatie acute e croniche, sindrome nefrosica, reazione di fase acuta.

Caratterizzazione Immunochimica delle Gammopatie Monoclonali. Gammopatie poli e monoclonali. Condizioni cliniche che si associano alla presenza di una immunoglobulina monoclonale (CM) nel siero e/o nelle urine. Identificare, Quantificare, Caratterizzare e Seguire nel tempo Una CM. Immunofissazione e immunosottrazione. False componenti monoclonali. Proteinuria di Bence Jones. Mieloma Multiplo delle catene leggere (micromolecolare). Rapporto K/L e dosaggio delle catene leggere libere (FLC). Il laboratorio nel Mieloma.

Indagini di laboratorio per lo studio della funzionalità renale. Il rene: funzioni endocrine; regolazione del ricambio idro-elettrolitico; sistema renina-angiotensina-aldosterone, ADH e peptidi natriuretici; osmolarità e osmolalità plasmatica e urinaria, misurata e calcolata. Il rene: regolazione dell’equilibrio acido-base. Sistemi tampone regolati a livello renale: Tampone bicarbonato; Tampone fosfato; Ione ammonio. Il rene: funzione escretoria del rene e gestione dei prodotti del metabolismo. Esami ematochimici per la valutazione della funzionalità renale: Azoto non proteico: Azotemia; Creatininemia. Concetto di clearance, valutazione del filtrato glomerulare misurato e calcolato con l’ausilio di formule. Esami complementari allo studio della funzionalità renale: Esame emocromocitometrico; Elettroforesi delle sieroproteine; Elettroforesi delle proteine urinarie.

Esame urine: esame organolettico, esame chimico -fisico, analisi microscopica del sedimento urinario. Significato clinico del referto dell’esame urine e degli elementi riscontrati all’esame microscopico del sedimento.

Ciaccio, Lippi. Biochimica Clinica e Medicina di Laboratorio. Edizioni Edises.

1. ELEMENTI DI DIAGNOSTICA MICROBIOLOGICA
Tecniche per la ricerca e l’identificazione degli agenti infettivi che causano malattia nell’uomo (batteri, virus, parassiti e miceti)
Metodi diretti (principali colorazioni, ricerca di antigeni e acidi nucleici microbici).
L’esame colturale (terreni di coltura di base, arricchiti, selettivi e differenziali, tempi e modalità di incubazione, lettura, carica microbica)
Metodi sierologici (agglutinazione, precipitazione, fissazione del complemento, neutralizzazione, ELISA, western blotting)
Antibiogramma (tecniche di diluizione e di diffusione)
Concentrazione minima inibente (MIC) concentrazione minima battericida (MBC)
Criteri interpretativi della MIC
Metodi rapidi ed automazione in Microbiologia
2. ANTIMICROBICI
Meccanismi di resistenza agli antimicrobici e metodi per la loro identificazione (meticillino-resistenza, vancomicino-resistenza, beta-lattamasi a spettro esteso, carbapenemasi)
3. SCELTA DEL CAMPIONE CLINICO, MODALITA’ DI PRELIEVO RACCOLTA E CONSERVAZIONE, PRINCIPALI AGENTI EZIOLOGICI RESPONSABILI DI INFEZIONE, APPROCCIO DIAGNOSTICO, INTERPRETAZIONE DEL RISULTATO DI LABORATORIO NELLE INFEZIONI DEL:
torrente circolatorio
sistema nervoso centrale
apparato respiratorio
apparato digerente
tratto urinario sessualmente trasmesse
ostetriche e perinatali
epatiti infettive virali e HIV
infezioni nosocomiali.

Roberto Cevenini. Microbiologia Clinica. Piccin Ed.
Madigan M.T. et al.: ”Brock. Biologia dei Microrganismi” vol. 2 Microbiologia Biomedica, Pearson ed.
Eudes Lanciotti. Principi di Microbiologia Clinica. CEA Editore
P.R. Murray, K.S: Rosenthal, M.A. Pfaller. Microbiologia medica. Masson Ed

Procedure diagnostiche e percorsi interpretativi applicate al laboratorio di microbiologia clinica, con particolare riferimento alla raccolta, conservazione, modalità d'invio e trattamento del campione da sottoporre ad indagine microbiologica. La Microbiologia Clinica delle infezioni del: sistema nervoso centrale, materno-fetali e genitali, vie urinarie, apparato gastroenterico, apparato respiratorio, cute e mucose, apparato locomotore, vascolari sistemiche, batteriemie e sepsi, nosocomiali

Roberto Cevenini. Microbiologia Clinica. Piccin Ed.
P.R. Murray, K.S: Rosenthal, M.A. Pfaller. Microbiologia medica. Masson Ed.
G. Antonelli, M. Clementi, G. Pozzi, G.M. Rossolini. Microbiologia medica. Casa Editrice Ambrosiana