La diagnosi istologica, la biopsia tissutale, modalita’ di prelievo del materiale nei diversi organi e cenni diagnostici, gestione del prelievo bioptico, allestimento dei preparati istologici, la diagnosi istologica intraoperatoria, il congelamento dei tessuti, osservazione delle sezioni al microscopio. I laboratori di Anatomia Patologica, l’organizzazione, le procedure, gli apparecchi. L’unita’ di Anatomia Patologica, l’accettazione, il laboratorio di macroscopia, il laboratorio di istopatologia, l’osservazione al microscopio e l’interpretazione diagnostica dei preparati istologici, il laboratorio di istochimica ed immunoistochimica, il laboratorio di biologia molecolare, gli archivi. Rilevazione di glucidi, proteoglicani, acidi nucleici, proteine, lipidi, enzimi.Presupposti e limiti delle tecniche istochimiche. Inclusione dei tessuti calcificati con metodi fisici.

L.Ruco ed A.Scarpa: Anatomia Patologica, le basi. UTET editore, 2007 E. Bonucci: Manuale di istochimica. Lombardo editore, 1981 G. Silvestrini: Appunti d’ immunoistochimica (inedito) G. Griffiths: Fine structure immuno-cytochemistry. Springer-Verlag editori, 1993

Differenze tra istologia e citologia. Macchinari di utilizzo in laboratorio di citologia (centrifuga, citocentrifuga, cappa aspirante). Materiale di consumo. Fasi di lavorazione: accettazione, allestimento campioni, colorazione, montaggio, conservazione dei campioni, archiviazione. Colorazioni di Papanicolaou, MGG, PAS. Tecniche ancillari in citologia: istochimica e immunoistochimica. Allestimento dei citoinclusi in paraffina, processazione, taglio e colorazione. Principi generali di citologia esfoliativa ed agoaspirativa e scopi diagnostici. Criteri citologici di malignità e di benignità. Inquadramento delle neoplasie. Fattori di rischio, stili di vita, cancerogeni. Aspetto macroscopico delle neoplasie. Differenze tra tumori benigni e maligni. Principali classificazioni per istotipo e per organo. Citologia esfoliativa: Pap-test. Citologia urinaria. Espettorato. Broncolavaggio. Liquor. Versamenti e lavaggi. Citologia agoaspirativa: polmonare, tiroidea, altri organi palpabile e profondi (ghiandole salivari, mammella). Uso del microscopio ottico e tecniche di screening. Criteri citologici di malignità e di benignità in citologia cervice-vaginale. Atipie precancerose delle cellule squamose e delle cellule ghiandolari della cervice uterina. Criteri di malignità: aumento del rapporto nucleo/citoplasma, ipercromasia, anisocariosi, polimerismo nucleare e cellulare, aumento di dimensioni del nucleolo, polinucleazione, mitosi atipiche. Classificazione Bethesda: ASC-US, ASC-H, L-SIL, H-SIL, AGC. Carcinoma squamoso della cervice uterina e adenocarcinoma.

I testi sono a scelta dello studente. Ruco - Scarpa - Anatomia patologica - Le basi UTET Rubin - Anatomia Patologica - L'essenziale di Anatomia Patologica- Piccin (per approfondimenti)

Differenze tra istologia e citologia. Macchinari di utilizzo in laboratorio di citologia (centrifuga, citocentrifuga, cappa aspirante). Materiale di consumo. Fasi di lavorazione: accettazione, allestimento campioni, colorazione, montaggio, conservazione dei campioni, archiviazione. Colorazioni di Papanicolaou, MGG, PAS. Tecniche ancillari in citologia: istochimica e immunoistochimica. Allestimento dei citoinclusi in paraffina, processazione, taglio e colorazione. Principi generali di citologia esfoliativa ed agoaspirativa e scopi diagnostici. Criteri citologici di malignità e di benignità. Inquadramento delle neoplasie. Fattori di rischio, stili di vita, cancerogeni. Aspetto macroscopico delle neoplasie. Differenze tra tumori benigni e maligni. Principali classificazioni per istotipo e per organo. Citologia esfoliativa: Pap-test. Citologia urinaria. Espettorato. Broncolavaggio. Liquor. Versamenti e lavaggi. Citologia agoaspirativa: polmonare, tiroidea, altri organi palpabile e profondi (ghiandole salivari, mammella). Uso del microscopio ottico e tecniche di screening. Criteri citologici di malignità e di benignità in citologia cervice-vaginale. Atipie precancerose delle cellule squamose e delle cellule ghiandolari della cervice uterina. Criteri di malignità: aumento del rapporto nucleo/citoplasma, ipercromasia, anisocariosi, polimerismo nucleare e cellulare, aumento di dimensioni del nucleolo, polinucleazione, mitosi atipiche. Classificazione Bethesda: ASC-US, ASC-H, L-SIL, H-SIL, AGC. Carcinoma squamoso della cervice uterina e adenocarcinoma.

I testi sono a scelta dello studente. Ruco - Scarpa - Anatomia patologica - Le basi UTET Rubin - Anatomia Patologica - L'essenziale di Anatomia Patologica- Piccin (per approfondimenti)

Tecniche di immunoistochimica su sezioni di tessuti congelati, tecniche di immunoistochimica su sezioni di tessuti fissati, il concetto di antigene ed anticorpo, gli anticorpi monoclonali e policlonali e loro vantaggi e svantaggi, tecniche di rilevazione degli antigeni con metodo diretto ed indiretto, tecniche di smascheramento degli antigeni, tecniche di amplificazione del segnale, il metodo di biotina-avidina, il metodo CARD (Catalyzer Reporter Deposition), i metodi che utilizzano complessi PAP (perossidasi antiperossidasi) e APAAP (fosfatasi alcalina antifosfatasi alcalina), i polimeri, gli artefatti in immunoistochimica, i controlli positivi e negativi. L’immunofluorescenza e sue applicazioni. L’interpretazione della reazione immunoistochimica, i pattern di reattivita’, localizzazione della reattivita’, intensita’ dell’immunocolorazione, scelta del sistema di rivelazione, i controlli di specificita’ della reazione, le applicazioni diagnostiche dell’immunoistochimica. I profili immunofenotipici, marcatori istogenetici e di differenziazione, gli antigeni di differenziazione leucocitaria, marcatori funzionali, fattori di trascrizione, determinazione della quota di cellule proliferanti, marcatori prognostici e marcatori predittivi di risposta terapeutica, identificazione di antigeni virali.

L.Ruco ed A.Scarpa: Anatomia Patologica, le basi. UTET editore, 2007 E. Bonucci: Manuale di istochimica. Lombardo editore, 1981 G. Silvestrini: Appunti d’ immunoistochimica (inedito) G. Griffiths: Fine structure immuno-cytochemistry. Springer-Verlag editori, 1993

Principali campi di applicazione diagnostica della microscopia elettronica. Microscopio elettronico a trasmissione (TEM) e microscopio elettronico a scansione (SEM): principi di funzionamento. Laboratorio di microscopia elettronica: la fissazione, l’allestimento delle inclusioni, ultramicrotomia, osservazione al microscopio elettronico a trasmissione. Protocollo base per la preparazione dei campioni biologici per l’esame ultrastrutturale (TEM)ed individuazione dei principali artefatti e difetti di preparazione. Microscopia elettronica come metodica di seconda scelta nella diagnosi istopatologica utilizzando campioni già preparati per l’istologia e/o la citologia: metodi di preparazione e limiti. Applicazione (pre- o post-inclusione) nella diagnostica ultrastrutturale di metodiche “speciali”: istochimica; istochimica enzimatica; immunoistochimica. Presentazione di alcuni esempi tratti dalla pratica diagnostica ultrastrutturale.

L.Ruco ed A.Scarpa: Anatomia Patologica, le basi. UTET editore, 2007 E. Bonucci: Manuale di istochimica. Lombardo editore, 1981 G. Silvestrini: Appunti d’ immunoistochimica (inedito) G. Griffiths: Fine structure immuno-cytochemistry. Springer-Verlag editori, 1993