Modulo: SCIENZE TECNICHE DI MEDICINA DI LABORATORIO |
Lingua
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ITA |
Corso di laurea
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Tecniche di laboratorio biomedico (abilitante alla professione sanitaria di Tecnico di laboratorio biomedico) RIETI - Corso di laurea F - ASL Rieti |
Programmazione per l'A.A.
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2019/2020 |
Anno
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Terzo anno |
Unità temporale
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Primo semestre |
Tipo di attestato
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Attestato di profitto |
Crediti
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2
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Settore scientifico disciplinare
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MED/46
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Ore Aula
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20
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Ore Studio
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-
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Attività formativa
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Attività formative caratterizzanti
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Canale Unico
Docente
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MASUELLI LAURA
(programma)
Il microscopio elettronico a trasmissione, Preparativa microscopia elettronica a trasmissione: prelievo, fissazione, inclusione, taglio, colorazione, Applicazioni biomediche della microscopia elettronica: patologie delle ciglia, patologie renali, malattie da accumulo, Principi di immunomarcatura ultrastrutturale, Il microscopio elettronico a scansione, Differenze tra microscopia elettronica a trasmissione e microscopia elettronica a scansione
materiale didattico fornito durante le lezioni
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Date di inizio e termine delle attività didattiche
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-- -
-- |
Modalità di erogazione
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Tradizionale
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Modalità di frequenza
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Obbligatoria
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Metodi di valutazione
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Prova orale
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Docente
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CAPOZZI ANTONELLA
(programma)
Colture Cellulari: caratteristiche dei vari tipi di colture cellulari, condizioni sperimentali necessarie per una coltura "in vitro", organizzazione di un laboratorio per colture cellulari
Allestimento di una coltura cellulare: colture immortalizzate (a lungo termine); conta cellulare e curva di crescita, coltura primaria (a breve termine); separazione di cellule mononucleate da sangue periferico
Applicazioni delle colture cellulari: esperimenti di ricerca, diagnostica specialistica (preparati per analisi sierologiche eseguite in immunofluorescenza, farmacologia, diagnosi prenatale (villocentesi e amniocentesi), tecniche di fecondazione "in vitro" (IVF e ICSI)
materiale didattico fornito durante le lezioni
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Date di inizio e termine delle attività didattiche
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-- -
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Modalità di erogazione
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Tradizionale
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Modalità di frequenza
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Obbligatoria
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Metodi di valutazione
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Prova orale
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Modulo: DIAGNOSTICA MOLECOLARE SU TESSUTO |
Lingua
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ITA |
Corso di laurea
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Tecniche di laboratorio biomedico (abilitante alla professione sanitaria di Tecnico di laboratorio biomedico) RIETI - Corso di laurea F - ASL Rieti |
Programmazione per l'A.A.
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2019/2020 |
Anno
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Terzo anno |
Unità temporale
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Primo semestre |
Tipo di attestato
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Attestato di profitto |
Crediti
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2
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Settore scientifico disciplinare
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MED/08
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Ore Aula
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20
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Ore Studio
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-
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Attività formativa
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Attività formative caratterizzanti
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Canale Unico
Docente
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Sioletic Stefano
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Date di inizio e termine delle attività didattiche
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-- -
-- |
Modalità di frequenza
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Non obbligatoria
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Modulo: METODOLOGIA DIAGNOSTICA MOLECOLARE
(obiettivi)
Lo studente deve conoscere le tecniche di analisi molecolare applicate alla diagnosi di malattie neoplastiche, genetiche ed ereditarie. Si affrontano gli aspetti legati all’analisi del DNA nelle scienze forensi. Il corso affronta inoltre i principi generali dell’analisi biomolecolare degli acidi nucleici applicata ai tessuti.
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Lingua
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ITA |
Corso di laurea
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Tecniche di laboratorio biomedico (abilitante alla professione sanitaria di Tecnico di laboratorio biomedico) RIETI - Corso di laurea F - ASL Rieti |
Programmazione per l'A.A.
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2019/2020 |
Anno
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Terzo anno |
Unità temporale
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Primo semestre |
Tipo di attestato
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Attestato di profitto |
Crediti
|
2
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Settore scientifico disciplinare
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MED/05
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Ore Aula
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20
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Ore Studio
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-
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Attività formativa
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Attività formative caratterizzanti
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Canale Unico
Docente
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CARDUCCI CARLA
(programma)
Richiami di struttura e funzione delle macromolecole
Mutazioni. Effetti delle mutazioni: la patologia dei vari tipi di alterazione
Nomenclatura delle mutazioni.
Cenni di bioinformatica
Principali database e ricerca di informazioni. Utilizzo dei principali database (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/, http://www.ensembl.org/) per le applicazioni di diagnostica molecolare.
Estrazione DNA e RNA
Fase preanalitica e preparazione del campione. Estrazione acidi nucleici: metodi manuali e commerciali. L’automazione nel lab. di biologia molecolare diagnostica. Concentrazione acidi nucleici e valutazione della qualità tramite tecniche spettrofotometriche classiche e micrometodi.
PCR: principi e applicazioni alla patologia molecolare diagnostica
Organizzazione del laboratorio. Rischi di contaminazioni e strategie per evitarli. Controlli di qualità.
Elettroforesi acidi nucleici, metodi classici e semi-automatizzati. Metodi di colorazione
Elettroforesi capillare degli acidi nucleici: Principi e strumentazione utilizzata
Tecniche di indagine di mutazioni note e applicazioni
Uso della PCR nella diagnosi di patologie causate da microdelezioni:
- microdelezioni del cromosoma Y
- analisi delle delezioni esoniche nella Distrofia Muscolare Duchenne/Becker
PCR-ARMS
- Principio del metodo. Sensibilità e specificità. Applicazioni.
Analisi di restrizione
- Enzimi di restrizione. Come le endonucleasi riconoscono una mutazione. Metodi di rilevazione. Sensibilità e specificità. Applicazioni (anemia falciforme, emocromatosi, malattie mitocondriali) Analisi di restrizione con la tecnica “PCR-mediated site direct mutagenesis”
Tecniche di ibridazione
- Principi. Marcatura delle sonde., Dot/slot blot.
Diagnosi di fibrosi cistica
- Test biochimici e molecolari. Screening neonatale, Test del sudore, tecniche molecolari: tecniche utilizzate per l’analisi di mutazioni più frequenti (RBD, PCR-ARMS,),sensibilità e specificità.
Real Time PCR : utilizzo del metodo per il genotyping: esempio :diagnosi molecolare delle trombofilie ereditarie
Malattie da espansioni di triplette: PCR e Southern Bolt.Applicazioni all’X-Fragile e alla m. di Huntington
Ricerca di mutazioni non note
Analisi di SNPs tramite sequenziamento diretto: metodi, marcature e funzionamento della strumentazione automatizzata. Lettura degli elettroferogrammi e interpretazione dl risultato.
Test di secondo livello per Fibrosi Cistica.
Tecnica MLPA per analisi di delezioni/duplicazioni esoniche presenti in eterozigosi
Cenni sulle tecniche di sequenziamento di nuova generazione.
Richiami di struttura e funzione delle macromolecole
Mutazioni. Effetti delle mutazioni: la patologia dei vari tipi di
alterazione
Cenni di nomenclatura delle mutazioni.
Estrazione DNA
e RNA
Fase preanalitica e
preparazione del campione. Estrazione acidi nucleici: metodi manuali e
commerciali Concentrazione acidi nucleici e valutazione della qualità tramite
tecniche spettrofotometriche.
PCR: principi e
applicazioni alla patologia molecolare diagnostica
Organizzazione del laboratorio. Rischi di contaminazioni e strategie per
evitarli. Controlli di qualità.
Tecniche di
indagine di mutazioni note e applicazioni
Uso della PCR nella diagnosi di patologie causate da microdelezioni:
-
microdelezioni del cromosoma Y
-
analisi delle delezioni esoniche nella Distrofia
Muscolare Duchenne/Becker
PCR-ARMS
- Principio del metodo.
Sensibilità e specificità. Applicazioni.
Analisi di restrizione
-
Enzimi di restrizione. Come le endonucleasi riconoscono una
mutazione. Metodi di rilevazione. Sensibilità e specificità. Applicazioni
(anemia falciforme, emocromatosi, malattie mitocondriali) Analisi di
restrizione con la tecnica “PCR-mediated site direct mutagenesis”
Tecniche di ibridazione
- Principi. Marcatura delle
sonde. Southern
Blot, Dot/slot blot.
Elettroforesi
capillare degli acidi nucleici
Diagnosi
molecolare di fibrosi cistica
-
Test del sudore e analisi molecolare. Tecniche utilizzate per l’analisi di
mutazioni più frequenti (RBD, PCR-ARMS, PCR-OLA),sensibilità e specificità.
Analisi di secondo (sequenziamento) e terzo livello (MLPA e analisi dei
trascritti)
Real Time PCR: analisi
espressione trascritti e analisi di mutazioni puntiformi con HRM. Applicazioni
della real time PCR in oncoematologia: valutazione della MMR
Diagnosi
molecolare delle trombofilie ereditarie
Analisi di SNPs
tramite sequenziamento diretto.
Dispense fornite dal docente
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Date di inizio e termine delle attività didattiche
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-- -
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Date degli appelli
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Date degli appelli d'esame
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Modalità di erogazione
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Tradizionale
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Modalità di frequenza
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Obbligatoria
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Metodi di valutazione
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Prova orale
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Attivita di supporto alla didattica
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nessuna |
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