Generale Conoscere l’applicazione delle principali metodiche di biochimica clinica e biologia molecolare. Conoscere le caratteristiche delle fasi pre-analitica, analitica e post-analitica dei test di laboratorio. Conoscere la finalità, le caratteristiche e i limiti dei principali test di laboratorio di biochimica clinica e biologia molecolare. Principi generali e applicazioni della biochimica clinica e della biologia molecolare clinica. Descrizione e utilizzo dei principali test di laboratorio di biochimica clinica e loro uso nei corrispondenti percorsi diagnostico-terapeutici. Descrizione e utilizzo dei principali test di laboratorio di biologia molecolare clinica ed esempi di utilizzo nella diagnosi delle più frequenti malattie genetiche. Argomenti specifici Appropriatezza in Medicina di Laboratorio. Corretto iter diagnostico. Saper richiedere un’indagine di laboratorio. Variabilità analitica e variabilità biologica. Prelievo e raccolta del campione. Precisione, accuratezza, sensibilità e specificità analitiche. L’errore in Medicina di Laboratorio. I controlli di qualità intra e inter laboratorio. Saper interpretare un’indagine di laboratorio. Intervalli di riferimento, valori critici e limiti decisionali. Differenza critica. Come valutare un test diagnostico. Prevalenza, sensibilità e specificità diagnostiche. Efficacia diagnostica e valori predittivi positivi e negativi. Curve ROC. Principali metodi analitici di biochimica: spettrofotometria, spettrofluorimetria, nefelometria, elettroforesi. Principali metodi analitici di biologia molecolare: amplificazione enzimatica in vitro (PCR), ibridazione diretta, ibridazione inversa, PCR/OLA/SCS, sequenziamento del DNA, principi di next generation sequencing. Funzioni delle proteine plasmatiche. Separazione elettroforetica delle sieroproteine. Il tracciato elettroforetico (descrizione delle principali proteine separate elettroforeticamente ed indicazioni cliniche alla loro richiesta). Il referto dell’elettroforesi delle sieroproteine. Condizioni associate ad alterazioni specifiche del tracciato elettroforetico. Gammopatie poli e monoclonali e loro caratterizzazione. Immunofissazione e immunosottrazione. False componenti monoclonali.

Ciaccio, Lippi. Biochimica Clinica e Medicina di Laboratorio. Edizioni Edises.

Tecniche immunometriche. Marcatori enzimatici. Gli enzimi quali marcatori di funzione e di lesione. Significato diagnostico degli enzimi plasmatici: riconoscimento della tipologia, dell'estensione e della gravità della lesione, riconoscimento di organo. Isoenzimi. Isoforme. Profili enzimatici ed enzimogrammi d'organo. Il sangue. Ferro, protoporfirina e globine: fisiopatologia, biochimica clinica e diagnostica di laboratorio. Anemie sideropeniche, porfirie, talassemie e emoglobinopatie. Proprietà immunologiche degli eritrociti, gruppi sanguigni. Sistema di gruppo sanguigno ABO, sistema di gruppo sanguigno Rh, sistema di gruppo sanguigno KELL.

Appunti e diapositive delle lezioni Antonozzi I., Gulletta E.: Medicina di Laboratorio Logica e Patologia clinica. Editore Piccin Nuova Libreria S.p.A.

Tutti gli approcci diagnostici iniziano con la raccolta del campione dal paziente. Campioni per la diagnosi di infezione. Raccolta e trasporto dei campioni. Esame diretto: microscopia a campo chiaro, a campo scuro, a fluorescenza, microscopia elettronica. Colorazione di Gram e Ziehl-Neelsen. Isolamento e identificazione di batteri e funghi, terreni di coltura, condizioni atmosferiche, caratteristiche biochimiche, spettrometria di massa, struttura antigenica, sistema immunologico, metodi per la rilevazione di una reazione antigene-anticorpo: precipitazione, agglutinazione, inibizione dell'emoagglutinazione: immunoanalisi enzimatica, EIA, immunofluorescenza. Classificazione sierologica: rilevazione di anticorpi, Western Blot. Metodi diagnostici molecolari: ibridazione e sonde di DNA, applicazioni diagnostiche della reazione a catena della polimerasi (PCR), Real-Time PCR, sequenziamento PCR. Diagnosi di infezione a partire dal sito anatomico: Sangue, urina, liquido cerebrospinale, secrezioni respiratorie: gola, rinofaringe, parte inferiore del tratto respiratorio, aspirazione transtracheale, broncoscopia, biopsia polmonare, lavaggio broncoalveolare. Campioni gastrointestinali, Campioni uretrali e vaginali.

1-Microbiologia medica, di Patrick R. Murray, Ken S. Rosenthal, Michael A. Pfaller 2-Principi di microbiologia medica di Michele La Placa 3-Microbiologia Clinica Eugenio Agenore Debbia, Esculapio

Le indagini di laboratorio nella valutazione della funzionalità endocrina. Ipofisi: prolattina, ormone della crescita, ormoni dell’ipofisi posteriore. Tiroide: sintesi degli ormoni tiroidei e metabolismo, asse ipotalamo-ipofisi-tiroide. Screening dell’ipotiroidismo congenito. Carenza iodica. Gozzo endemico. Ipotiroidismi. Ipertiroidismi. Tumori della tiroide Surrene: ormoni della midollare del surrene, ormoni della corticale del surrene. Deficit enzimatici. Glucocorticoidi: Iperglucocorticoidismo (Ipercortisolismo). Insufficienza surrenalica. Asse Renina-Aldosterone. Ipermineralcorticoidismo. Ipomineralcorticoidismo. Androgeni del cortico surrene. Carcinomi. Le indagini di laboratorio nella valutazione della funzione riproduttiva. Testosterone. Regolazione della riproduzione maschile. Esame del liquido seminale. Estrogeni. Progesterone. Regolazione della riproduzione femminile. Indagini di laboratorio nella valutazione del sistema riproduttivo femminile. Valutazione diagnostica di laboratorio della gravidanza in condizioni normali e patologiche. Valutazione della funzionalità feto-placentare. Utilità clinica della determinazione della gonadotropina corionica. Il ruolo del laboratorio di Patologia clinica nella diagnostica prenatale: sindrome di Down, trisomia 18, difetti del tubo neurale. Eritroblastosi fetale, diabete gestazionale, maturità del polmone fetale, tossiemia della gravidanza (pre-eclampisa). Rottura prematura delle membrane. Asfissia fetale. Indicatori biochimici del metabolismo dell’osso: calcio, fosforo, magnesio; gli ormoni regolatori del metabolismo minerale. Disordini del metabolismo minerale: ipercalcemia, ipocalcemia, iperfosfatemia, ipofosfatemia, ipermagnesiemia, ipomagnesiemia. Indicatori biochimici del rimodellamento osseo: marcatori del riassorbimento e della formazione dell’osso. Malattie metaboliche dell’osso: osteoporosi, osteomalacia, malattia di Paget. Il laboratorio nella medicina preventiva: la prevenzione secondaria tramite lo screening neonatale Nascita dello screening neonatale, principi di inclusione, evoluzione tecnologia. Test di screening e test di conferma. Algoritmi diagnostici.

Appunti e diapositive delle lezioni Antonozzi I., Gulletta E.: Medicina di Laboratorio Logica e Patologia clinica. Editore Piccin Nuova Libreria S.p.A. III edizione

Le esercitazioni riguarderanno il riconoscimento microscopico di generi batterici sottoposti a colorazione di gram e di Ziehl-Neelsen, osservazione morfologica di colonie batteri su terreni solidi di coltura

1-Microbiologia medica, di Patrick R. Murray, Ken S. Rosenthal, Michael A. Pfaller 2-Principi di microbiologia medica di Michele La Placa 3-Microbiologia Clinica Eugenio Agenore Debbia, Esculapio

Valore diagnostico e nicchie di applicazione delle indagini dirette e indirette nelle diagnosi parassitologiche Diagnosi molecolare e sierologica delle parassitosi Indicatori di parassitosi Algoritmi diagnostici delle principali parassitosi Parassiti nosocomiali e loro percorso diagnostico.

Gabriella Cancrini Parassitologia Medica Illustrata C.E. EDRA