Docente
|
PALUMBO VALERIA LUCIANA
(programma)
Il ciclo cellulare. Fasi e punti di controllo del ciclo cellulare.
Nozioni introduttive sulla divisione cellulare (mitosi e meiosi). Fasi della mitosi e citochinesi. Le chinasi mitotiche.
Sistemi modello per lo studio per lo studio della divisione cellulare; D. melanogaster, C. elegans, S. cerevisiae, S. pombe, X.laevis, colture cellulari.
Approcci per lo studio della divisione cellulare. Analisi genetica diretta e analisi genetica inversa per la dissezione genetico-molecolare della mitosi; Mutagenesi, RNA interference (RNAi), CRISPR/Cas genome editing.
Metodologie per lo studio della divisione cellulare. Tecniche istologiche di base e osservazione in vivo; Microscopio (ottico, elettronico). Preparazione del tessuto e tecniche di evidenziazione (immunofluorecenza indiretta, marcatura con GFP). Tecniche biochimiche; isolamento e identificazione di proteine mitotiche e complessi proteici.
Proteine citoscheletriche in mitosi. Microfilamenti; G-actina, F-actina, fuso centrale. Filmenti intermedi; Lamine nucleari e NEBD. Microtubuli; isoforme di Tubuline, composizione del fuso mitotico, proteine associate ai microtubuli (MAPs) e proteine motore.
Il centrosoma. Struttura, assemblaggio e funzione dei centrioli. Maturazione del centrosoma. Il materiale pericentriolare (PCM). Il corpo basale e formazione del cilio. Cilia primarie e cilia mobili. Disfunzione del centrosoma e condizioni patologiche nell’uomo: ruolo delle alterazioni della struttura e del numero dei centrosomi nell’insorgenza dei tumori e nella microcefalia primaria. Disfunzione del cilio e ciliopatie.
Meccanismi molecolari della formazione del fuso mitotico. Nucleazione di microtubuli dal centrosoma, funzione del MTOC. Nucleazione di microtubuli dalla cromatina, il gradiente RanGTP, il Chromosomal passenger complex. Nucleazione di microtubuli da microtubuli esistenti, complesso dell’Augmnina. Ruolo delle proteine motore e delle MAPs nella dinamica dei microtubuli e nella formazione dei fusi bipolari.
Il cintetocore. Struttura del cinetocore. Interazione microtubulo-cinetocore. Meccanismi molecolari alla base del movimento anafasico dei cromosomi. Il checkpoint del fuso, proteine coinvolte e loro funzioni. Regolazione della separazione tra cromatidi fratelli; APC, Securine, Separasi e Coesine.
La citochinesi. Ruolo dell’anello contrattile e del fuso centrale. La formazione di nuova membrana. Difetti della citochinesi e tumorigenesi.
Divisione mitotica delle cellule staminali. I neuroblasti di Drosophila come sistema modello e conservazione evolutiva dei meccanismi molecolari alla base della divisione asimmetrica. Difetti nella divisione asimmetrica e sviluppo tumorale.
- Capitoli 16 e 18 dell’Alberts et al., “Biologia Molecolare della Cellula”, Zanichelli Editore.
- Materiale didattico elaborato dal docente sulla base di articoli scientifici e testi.
Il materiale didattico e la bibliografia di riferimento verranno condivisi su piattaforma E-learning.
|